Proprietățile tinctului - baza microscopiei bacteriilor

Varietatea infecțiilor bacteriene necesită o identificare clară a agentului patogen și a definiției speciilor sale. Determinarea tipului de microbiologi ai microorganismului este ajutat de proprietățile sale tincturale - susceptibilitatea microbului de a colora cu coloranți diferiți. Această metodă vă permite să explorați morfologia agentului patogen. Proprietățile bacteriene ale bacteriilor sunt de o mare importanță pentru cercetarea practică și teoretică în domeniul microbiologiei.

Investigarea microbilor

În bacteriologie, există multe metode de colorare a microorganismelor. Toate acestea se bazează pe proprietățile tincturii ale bacteriilor. Colorarea vă permite să determinați forma, structura, dimensiunea, poziția relativă. Acest lucru permite rezolvarea problemelor de sistematizare a microorganismelor de biologie generală și microbiologie comparativă.

De ce să le pictezi?

Bacteriile - este aproape transparent organisme, fără utilizarea de colorare acestea sunt slab vizibile pentru microscopie conventionale. Puteți utiliza tipuri speciale de microscopie (contrast de fază, câmp întunecat) pentru studiul obiectelor, dar cel mai simplu mod este de a colorat, după care bacteriile devin vizibile în microscop cu lumină obișnuită.

Pregătirea probelor

Indiferent de tehnica de colorare utilizată, există reguli uniforme pentru pregătirea obiectului studiat. Obligatorii sunt următoarele etape:

• Instrumentele sterile fac o pată pe diapozitiv.
• Proba este uscată. Aceasta se face la temperatura camerei sau folosind dulapuri de uscare.
• Apoi urmează etapa de fixare - microorganismele se atașează la sticlă cu compoziții speciale.
• Colorația reală - proba este acoperită cu un colorant pentru o perioadă fixă ​​de timp, după care este spălată.
• Uscarea finală - proba este uscată din nou.
  

Cele mai comune vopsele

Cele mai des folosite coloranți pe bază de anilină cu valori diferite ale acidului (pH). Majoritatea coloranților sunt pulberi care sunt crescuți în alcool.

Coloranții, în care agenții de colorare sunt cationi, se numesc bazici (pH mai mare de 7). Ele pot fi folosite pentru a colora microorganismele în roșu (magenta, Safranină), purpuriu (metilviolet, tionina), albastru (albastru de metilen), verde (malachit verde), maro (obține chrysoidine) și negru culori (indulin).

Coloranții, în care agenții de colorare sunt anioni, se numesc acidici (pH mai mic de 7). Ele vor colora proba în culoarea roșie (eozină), galben (picrin) sau negru (nigrozină).

Există un grup de coloranți neutri (de exemplu, rodamina B), unde agenții coloranți sunt cationi și anioni.

Cultură viu sau mort

Metodele de colorare sunt împărțite în două grupe în funcție de forma de viață a probei de testare.

• Vital (intravital) colorare. Această metodă de studiere a proprietăților microorganismelor este utilizată în studiul țesuturilor vii, ceea ce face posibilă observarea proceselor de viață ale microbilor. Pentru astfel de colorări, se folosesc coloranți cu toxicitate scăzută și putere mare de penetrare.
• Posibilitatea de colorare postestal. Aceasta este colorarea microorganismelor moarte sau ucise. Datorită proprietăților tinctului bacteriilor, microbiologii își determină structura. Această colorare este cea mai utilizată.

Gram-pozitiv și gram-negativ

Aceste caracteristici ale bacteriilor se găsesc în instrucțiunile pentru diferite medicamente. Această metodă de studiere a proprietăților tinctului bacteriilor se bazează pe utilizarea colorantului violet de gențian și fixarea cu iod. Aceasta este tehnica lui Hans Christian Gram, un doctor danez care la propus în 1884. Ca rezultat al acestei colorări, bacteriile sunt împărțite în două grupe:

• Gram (+) - colorat albastru (stafilococi și streptococi).
• Gram (-) - sunt colorate în culori de la roz la roșu (enterobacterii, salmonella, E. coli).

Un rezultat diferit al colorării este obținut din cauza proprietăților inegale de tinctură ale pereților bacterieni. Metoda de colorare Gram și astăzi este principalul în diagnosticul unor boli infecțioase.

Alte metode de vopsire

Să descriem caracteristicile mai multor alte metode utilizate pe scară largă în bacteriologie.

• Metoda Tsilya-Nelson - determină rezistența la acid a bacteriilor. Identifică agenții cauzali ai tuberculozei și micobacteriei.
• Metodologia Romanovsky-Giemsa - acidofilus pata (acid acetic și acid lactic) bacterii în roșu și bazofile (spirochete și protozoare) - albastru.
• Metoda lui Morozov - pete bacterii în culoare maro și face vizibile flagella lor.

Puteți vedea sporii

Colorarea cu ficina Zilya vă permite să vedeți spori de bacterii. Având o culoare roz după vopsire, ele sunt vizibile în mod clar pe fondul bacteriilor albastre. Această metodă este, de asemenea, un instrument de bacteriologie și are o mare importanță practică.