Reguli pentru determinarea tipului de sânge în conformitate cu sistemul ABO

Procedura de stabilire a sistemului ABO de grup sanguin este de a identifica antigene A și B în eritrocite prin utilizarea anticorpilor și aglutinele standard în plasmă sau ser analizate prin eritrocite sanguine standard. Tehnica a fost dezvoltată la începutul secolului XX și este încă utilizată în mod activ în medicină. Determinarea antigenelor A și B se datorează zeolitonilor anti-A și anti-B.

Concepte de bază

Donatorii determină întotdeauna nu numai antigeni în eritrocite, ci și aglutinine în ser (plasmă) utilizând eritrocite standard. Sângele venos este folosit ca biomaterial. Înainte de test, trebuie să renunți la alimente grase cu o zi înainte de test și să nu fumezi timp de o jumătate de oră înainte de a lua testul. Grupurile de sânge sunt determinate de două ori: în primul rând în departamentul de tratament, unde materialul este recoltat și apoi confirmat printr-un studiu efectuat în laborator.

Definirea grupurilor de sânge în conformitate cu sistemul ABO este principalul test utilizat în transfusiologie. De asemenea, un sistem similar de grupe de sânge este prezent în unele animale, de exemplu în cimpanzeii, gorile și bonobos.

Istoria descoperirii

În știință, este în general acceptat că metoda de determinare a grupelor sanguine ABO sistem a fost descoperit pentru prima dată de Karl Landsteiner, un om de știință austriac, în 1900. Apoi a descris în lucrarea sa trei tipuri de antigeni. Pentru aceasta, în treizeci de ani, a primit Premiul Nobel pentru Medicină și Fiziologie. Datorită faptului că între oamenii de știință nu au fost strânse legături, iar mai târziu a constatat că medicul ceh Jan Jansky serologia, indiferent de cercetare Karl Landsteiner a descris pentru prima dată patru grupe de sânge uman, dar studiile sale nu au fost cunoscute publicului larg. În prezent, clasificarea dezvoltată de J. Jansky este aplicată în Rusia și în republicile fostei URSS. În Statele Unite, WL Moss și-a creat o activitate similară în 1910.

Metoda de determinare a grupurilor de sange conform sistemului ABO folosind tsoliklonov

Grupul de sânge trebuie determinat într-o cameră cu iluminare bună, respectând un interval de temperatură de 15-25 grade Celsius, deoarece abaterile de la această normă pot afecta rezultatele studiului. Inițial și prenumele pacientului sunt scrise pe plăcuță sau pe plăcuță. De la stânga la dreapta sau în jurul cercului, este aplicată notația standard pentru grupuri (O (I), A (II), B (III)). Sub ele, serurile adecvate sunt plasate în picături prin pipete separate pentru fiecare specie. Apoi sângele pacientului este adăugat la ele. Materialul pentru cercetare este luat din lobul urechii sau din deget. Aceasta necesită tehnica de determinare a grupului sanguin conform sistemului ABO.

De asemenea, este corect să se utilizeze celule roșii din sânge în eprubeta după formarea cheagurilor. Este necesar ca cantitatea de ser să fie mai mare decât cantitatea de sânge adăugată de zece ori. După aceasta, picăturile sunt amestecate cu bastoane de sticlă (separat pentru fiecare). În cinci minute, înclinând ușor placa, urmărind apariția unei reacții de hemaglutinare. Se găsește în faptul că apar mici bulgări roșii, care se îmbină în cele mai mari. În acest moment, serul își pierde aproape complet culoarea.

Pentru a elimina hemaglutinarea falsă a lipirii simple a celulelor roșii din sânge, după trei minute se adaugă o picătură de soluție salină și se verifică dacă aglutinarea rămâne. Dacă este așa, atunci este adevărat. Totul, definiția grupurilor de sânge în conformitate cu sistemul ABO în acest sens este finalizată.

Interpretarea rezultatelor

Ca urmare, pot exista patru reacții:

• nu există aglutinare cu nici unul dintre seruri - primul grup de O (I);
• reacția a fost manifestată cu serurile I (ab) și III (a) - al doilea grup A (II);
• aglutinarea are loc cu serurile I (ab) și II (b); - al treilea grup B (III);
• Dacă reacția are loc cu trei seruri, este necesar să se efectueze o procedură suplimentară cu grupul chimice AB (IV), care sunt standartnymi- dacă aglutinarea într-o astfel picătură lipsește, se poate presupune că acesta este grupul sanguin 4a AB (IV).

Metoda Express pentru factorul Rh

Metoda de determinare a grupelor de sânge în conformitate cu sistemul ABO presupune detectarea simultană a factorului Rh (Rh).

Suprafața plăcii este pre-udată și se scrie pe ea "ser de control" și "ser antiresus". Apoi, una sau două picături de reactivi necesari sunt plasate sub inscripții și materialul analizat este adăugat la ele. În acest scop, de asemenea, se poate folosi de sange de la un deget (în aceeași cantitate ca și volumul de ser) sau a celulelor roșii din sânge rămase în partea de jos a tubului după apariția unui cheag (jumătate de volum din ser). Alegerea materialului pentru rezultatul final nu este afectată. Apoi, sângele și serul sunt amestecate cu o tijă de sticlă uscată, după care așteaptă reacția să apară timp de cinci minute. Pentru a elimina citirile false, după trei până la patru minute, se adaugă o soluție izotonică de clorură de sodiu (doar câteva picături). Determinarea grupului de sânge în funcție de sistemul ABO și Rh este foarte des efectuată.

Dacă apare aglutinarea eritrocitelor într-o picătură cu ser, aceasta indică un rhesus de sânge pozitiv. Potrivit statisticilor, Rh + se găsește în 85% din populația lumii. Lipsa acesteia ne permite să vorbim despre afilierea Rh negativă. Dacă aglutinarea a apărut în serul de control, atunci a devenit inutilizabilă. Din păcate, algoritmul de determinare a grupului sanguin conform sistemului ABO nu funcționează întotdeauna perfect.

Ce greseli pot fi facute cu aceasta tehnica?

Inexactitățile în determinarea sângelui aparținând unui anumit grup depind de următoarele motive:

• Tehnic.
• Specificitatea biologică a sângelui.
• Natura incompletă a serurilor standard și a eritrocitelor.

Erori tehnice

Erorile posibile în determinarea grupului de sânge al sistemului ABO în mod încrucișat:

• Ser a fost incorect pe placă.
• Valori cantitative incorecte ale materialului.
• Utilizarea plăcilor sau plăcilor insuficient de curățate care intră în contact cu sângele (fiecare ser trebuie colectat printr-o pipetă separată, care trebuie spălată cu o soluție de clorură de sodiu (la o concentrație de 0,9%)).
• Înregistrarea incorectă a materialului analizat.
• Nerespectarea timpului necesar pentru declanșarea aglutinării - pentru a grăbi și a lua în considerare reacția înainte de expirarea a cinci minute nu ar trebui să fie, deoarece sângele poate avea aglutinogeni slabi. De asemenea, nu este necesar, deoarece picăturile se pot usca de pe margini și pot duce la închisoare falsă. Este important să urmați regulile pentru determinarea grupului de sânge în conformitate cu sistemul ABO.
  
• Centrifugarea eronată poate duce, de asemenea, la un rezultat fals.
• Temperatura aerului care depășește admisibil, afectează absența aglutinării. Pentru a evita astfel de greșeli, trebuie să utilizați un ser special, conceput pentru a lucra în climă caldă. Determinați grupurile de sânge pe o placă sau pe o placă, a cărei suprafață exterioară cade în apă rece.

Erori de specificitate biologică

Erori asociate cu specificitatea biologică a sângelui analizat sunt împărțite în două tipuri.

• În funcție de caracteristicile celulelor roșii din sânge.
• Erori datorate caracteristicilor biologice ale serului.

Să luăm în considerare fiecare specie în detaliu.

În funcție de caracteristicile celulelor roșii din sânge

• Aglutinarea târzie, datorită formelor "slabe" de eritrocite și antigene. Pentru a evita greșelile, este necesar să se determine grupul de sânge al donatorilor și beneficiarilor care utilizează eritrocite standard. Identificați aglutinogenul A₂ trebuie să fie reexaminată cu alte tipuri de reactivi și alte feluri de mâncare, mărind timpul de înregistrare a reacției.
• "Panaglutinarea" ("autoaglutinarea") - capacitatea sângelui de a arăta aceeași reacție a unui caracter nespecific cu toate serurile, inclusiv a sa. După cinci minute, acuitatea acestei aglutinări slăbește, deși ar trebui să se intensifice. Cazuri similare sunt observate la pacienții cu cancer, arși, etc. Ca martor este necesar să se evalueze manifestarea aglutinării eritrocitelor analizate în serul standard al celui de-al patrulea grup și soluție salină. Atunci când "panaglutinarea" se determină grupul de sânge ca rezultat al spălării triple a celulelor roșii din sânge. Dacă nu dă rezultatul dorit, merită să reanalizați proba de sânge într-un tub preîncălzit și plasați proba într-un recipient termos pentru a ajuta la menținerea unei temperaturi de 37 grade Celsius și peste. Apoi, acesta trebuie livrat într-un laborator unde temperatura este menținută și se utilizează salină fiziologică încălzită, plăci și reactivi.

• Uneori, celulele roșii din sângele analizat sunt aranjate ca "piloni de monede" și pot fi luați ca aglutinați. Dacă adăugați două picături de soluție izotonică și scuturați ușor placa, globulele roșii se fixează corect.
• Aglutinarea incompletă sau mixtă apărută la pacienții cu a doua, a treia și a patra grupă ca urmare a transplantului de măduvă osoasă sau în primele trei luni după transfuzia de sânge 0 (I).

Datorită caracteristicilor biologice ale serului

• În timpul testelor de rutină, anticorpi cu o specificitate diferită sunt detectați ca urmare a sensibilizării anterioare. Trebuie să o determinăm și să luăm celulele roșii din sânge fără conținutul antigenului la care este detectată imunizarea. Beneficiarul trebuie să selecteze în mod necesar sânge donator compatibil individual.
• Nu există anticorpi A și B, care se observă la nou-născuți și la pacienți care suferă de suprimarea imunității umorale.
• La formarea "monedelor", un rezultat anormal ar trebui confirmat prin luarea celulelor roșii sanguine standard din primul grup. O soluție de clorură de sodiu și balansarea plăcii ajuta la diferențierea reală a aglutinatelor și a "monedelor".
  

Erori asociate cu utilizarea de eritrocite și seruri standard inferioare

Serurile slabe, cu o durată de valabilitate anterioară sau având un titru mai mic de 1:32, pot iniția aglutinarea slabă și tardivă. Utilizarea unor astfel de reactivi este inacceptabilă.

Utilizarea eritrocitare sau seruri standard, inutilizabil preparate în condiții nesterile și conservate insuficient, conduce la apariția de aglutinare „bacterian“ având un caracter nespecific.

Există multe ipoteze populare despre grupurile de sânge ale sistemului ABO, care au apărut imediat după ce au fost detectate în diverse culturi mondiale. De exemplu, în anii 30 ai secolului trecut în Japonia și în alte țări, teoria care a legat grupul de sânge de unul sau altul de personalitate a câștigat popularitate. Teorii similare sunt populare astăzi.

Există de asemenea opinia că o persoană care are grupul A este supusă unei mahmureli severe, O este asociată cu dinți buni și grupul A2 - cu cel mai înalt nivel de IQ. Dar astfel de afirmații nu sunt dovedite științific.

Am examinat definiția grupurilor de sânge utilizând sistemul ABO utilizând seruri standard.