Fluorescentă microscopie: caracteristici de studiu

Termenul "microscopie" are rădăcini grecești. În traducere se înțelege studiul obiectelor care folosesc instrumente de înaltă precizie. Recent, oțel din ce în ce mai popular luminiscență și microscopie electronică

rezoluție

Sub aceasta, ca o regulă, să înțeleagă distanța minimă, pe care pot fi obiecte distincte clar. Rezoluția echipamentului va determina gradul de penetrare în lumea microscopică, posibilitatea de a lua în considerare dimensiunea elementului investigat. Cu o creștere mare a limitelor de obiecte poate fuziona. În consecință, există anumite limite dincolo de care aproximarea elementelor este lipsită de sens.

Metoda de microscopie luminescente: mecanism

În transformarea energiei absorbite de substanță în radiații vizibile există o strălucire. Se numește luminiscență. Acest fenomen se datorează faptului că unele substanțe aflate sub influența luminii încep să emită raze cu altă lungime de undă (de obicei mare). În plus, unele obiecte care au o anumită culoare sub lumină normală, sub influența luminii ultraviolete, își schimbă culoarea.

specificitate

Un obiect care nu poate fi văzut în lumina ultravioletă poate radia strălucirea strălucitoare dacă este tratată cu o substanță specială. În ele, elementele strălucesc în culori diferite în întuneric. Puterea radiațiilor este diferită, dar, de regulă, este mică. În acest sens, microscopia fluorescentă este eficientă într-o cameră întunecată. Când folosim acest tip de cercetare, obiectul este privit în lumină, pe care el însuși îl emite. Compoziția chimică a țesuturilor, celulelor va afecta calitatea studiului. Luminozitatea microscopică este considerată într-o anumită măsură un studiu histochimic.

clasificare

Fluorescentă microscopie pot fi primare sau secundare. În acest din urmă caz, obiectul este tratat cu compuși speciali care dau o strălucire. primar fluorescent microscopie se bazează pe capacitatea intrinsecă a elementului studiat de a emite lumină.

echipament

Luminozitatea microscopică se realizează utilizând o varietate de dispozitive. Iluminatorul servește ca element principal. Este echipat cu o lampă cu raze ultraviolete. În plus, dispozitivele folosesc un set de filtre. În unele dispozitive există o mulțime de configurații diferite. În funcție de culoarea utilizată pentru excitarea luminiscenței - ultraviolet sau albastru, se află un filtru potrivit între sursa de lumină și obiectul studiat. Deoarece strălucirea unui element microscopic este mai slab energetic decât lumina incitantă, acesta va fi prins doar sub o singură condiție. Excedentul de raze provenind de la sursă trebuie tăiat de un filtru galben-verde. Acesta este plasat pe ocularul dispozitivului. Cel mai pronunțat efect al luminiscenței va fi când filtrează complet radiațiile care ies din sursa de lumină.

Ce inseamna instalatia in radiatii vizibile? Are o sursă de lumină puternică și un microscop biologic. Între oglinda dispozitivului și lampă este instalat un filtru albastru-violet. Poate fi FS-1, UFS-3 și așa mai departe. Filtrul galben este pus pe ocularul microscopului. Cu ajutorul lor, o lumină albastru-violet cade pe obiect. De asemenea, el excită luminiscența. Dar această lumină poate interfera cu vederea strălucirii. Prin urmare, pe calea către ochi, este tăiat de un filtru galben. Iluminatul este setat conform metodei lui Kohler, cu o singură excepție. Diafragma condensatorului trebuie deschisă complet. În cadrul studiului, este important să se utilizeze nefluorescent ulei de imersie. Pentru a reduce emisiile proprii, se adaugă nitrobenzen (2-10 picături / 1 g).

Luminescent microscopie: aplicație în microbiologie

Avantajele acestui tip de cercetare sunt:

1. Posibilitatea de a obține imagini color.
2. Nivel ridicat de contrast al elementelor de emițător pe fundal negru.
3. Detectarea și detectarea localizării speciilor individuale de viruși și microbi.
4. Posibilitatea de a studia organisme vii transparente și opace.
5. Studiul proceselor de viață în dinamica lor.

De asemenea, trebuie spus că microscopia luminescentă contribuie la dezvoltarea celor mai bune metode de histo- și citochimie, diagnosticare rapidă.