Miercuri Ploskirev (Bactoagar F): descriere. Microbiologie medicală

Mediul Ploskirev (numit și Bactoagar G) este mediul nutritiv

poveste

Nikolai Ivanovich Ploskirev este microbiolog sovietic și doctor onorific al RSFSR. Sa născut în 1869 și a murit în 1948, cea mai mare parte a vieții sale lucrează în orașul său natal - Tomsk.

În 1888, el, un om de știință viitor, nu a terminat clasa a șasea a școlii, a intrat în serviciul militar. Și-a terminat studiile numai în 1892, după care a promovat examenul de admitere la Universitatea Tomsk din Imperial, studiat la Facultatea de Medicină. În 1898 a primit titlul de medic.

Ploskirev a participat la războiul ruso-japonez, după care a lucrat în spitalul Tomsk. În 1910, a fost numit șef al Spitalului Dermatovenerologic Tomsk și timp de treizeci de ani a fost capul său permanent. În mod similar, cercetătorul a fost unul dintre fondatorii unui dispensar dermatologic și venerologic din Tomsk.

Nikolai Ivanovich Ploskirev a scris o serie de lucrări dedicate luptei împotriva bolilor venerice.

structură

Miercuri Ploskirev - un material pentru cultivarea bacteriilor intestinale și, prin urmare, ar trebui să conțină mai multe tipuri de nutrienți. Se produce sub formă uscată.

Hidrolizatul pancreatic de șprot (10,4 g / l) are o pondere destul de mare în masa totală. Este puțin necesar pentru hidrogen citrat disodic (8,5 g / l). De asemenea, conține bulion nutritiv uscat și zahăr din lapte (8,62 și 7,3 g / l).

A doua denumire pentru mediul Ploskirev este Bactoagar J. Acesta conține agar în cantitate de 6,94 g / l. Conținutul de sulfat de sodiu anhidru este egal cu 5,1 g / l. Există prezența fosfatului disodic deshidratat - 2,1 g / l, a sărurilor de sodiu ale acizilor biliari de aproximativ 3,46 g / l și a cenușii de sodiu - 2,4 g.

Mai puțin gram conține indicatori - roșu neutru (0,05) și verde strălucitor (0,0002). Conținutul de iod este de 0,13.

cerere

Studiul proceselor biochimice ale bacteriilor joacă un rol foarte important în diagnosticarea bolilor care produc organisme anaerobe. Speciile care alcătuiesc această familie sunt sute. Ele sunt aproape identice în morfologia și proprietățile culturale, iar cea mai fiabilă modalitate de a le deosebi de ele este studiul biochimiei.

Studiul începe cu însămânțarea materialului patologic în mediul nutritiv. Este diferențială-patologică pentru grupul intestinal de bacterii, iar compoziția sa, în afară de agar de carne-agar, include un indicator și lactoză. Abilitatea de a procesa lactoza este un semn important al diferențierii enterobacteriilor. Dacă acest lucru este detectat, pH-ul se îndreaptă spre aciditate și se declanșează indicatorul pe care se colorează colonia.

În alte țări, pot fi utilizate și alte medii nutritive, dar mecanismul acțiunii lor corespunde celor trei cele mai frecvente în Rusia - mediile mediului Endo, Levin și Ploskirev.

Descrierea metodei

În străinătate, echivalentul mediului al lui Ploskirev este așa-numitul Agar MacConkey. În forma finită, soluția este transparentă, are o nuanță roz-galben deschis. Coloniile capabile să prelucreze lactoza în mediul Ploskirev sunt date cu roșu (afine) culoare. Dacă bacteria nu o poate procesa, colonia este fie colorată, fie incoloră.

Având în vedere că compoziția mediului Ploskirev include substanțe care inhibă (verde diamant, săruri biliare, iod), practic suprimă în totalitate creșterea florei gram-pozitive și, în prima zi, inhibă în mod semnificativ creșterea eshechiriei, precum și a celeilalte microflore însoțitoare.

A doua etapă

Apoi, are loc o selecție a coloniei de interes și se seamănă cu mediile primare de diferențiere și acumulare. Suprafața pe care are loc însămânțarea trebuie să conțină mai multe substraturi. Cultura bacteriană trebuie să detecteze activitatea enzimatică față de acestea, în afară de mediul în care se află tuburile de testare, astfel încât să existe două secțiuni:

• cel pe care agarul este înclinat;
• cu o coloană.

Colonia care interesează cercetătorul este populată pe partea înclinată cu un accident vascular cerebral dens, iar în coloană - cu un bolț. În acest stadiu, se folosesc presa scrisă de Russell, Kligler sau Olkenitsky. Ca diferențial-diagnostic, se folosește și mediul Ploskirev.

Microbiologie și agenți patogeni

Agarul lui Ploskirev este un factor important în detectarea infecțiilor cauzate de enterobacterii. De exemplu, ea crește și diferențiază colonii de microorganisme, care sunt agenții cauzali ai dizenteriei bacteriene. Acestea sunt organisme anaerobe care intră în genul Schigella.

Ca toți cei care fac parte din familia bacteriilor intestinale, Shigella sunt genul de tije, de dimensiunea a două micrometre. Ele nu formează capsule și spori, nu au flagelă - acest lucru le permite să se distingă de salmonella, care, la rândul său, este mobilă. Acestea cresc perfect pe cele mai simple medii, la o temperatură chiar deasupra temperaturii camerei (35-37 ° C) și a pH-ului de 7,4. Prin natura creșterii, coloniile nu diferă de salmonella.

După cum sa menționat mai sus, microorganismele nu pot avea practic diferențe morfologice, dar diferă semnificativ în procesele biochimice ale activității vitale. Deci, cu excepția Shigella Newcastle, fermentarea carbohidraților este formarea de acid fără gaz. Cu excepția shigella Sonne, ele nu pot fermenta lactoza, dar pot descompune glucoza. Doar la caracteristicile lor cheie pot fi atribuite faptului că pot reduce niracia la nitrit. Coloniile lor nu creează uree, iar în mediul nutritiv nu există lichefierea gelatinei.

Colectarea și prepararea inoculului

Pentru a detecta agenții patogeni ai dizenteriei, sunt necesare studii microbiologice ale mediilor infectate, adică mișcările intestinului pacientului. După primirea materialului, este necesar să se semene cât mai curând posibil. Dacă acest lucru nu este posibil, sursa trebuie plasată într-un conservant - un amestec de tampon fosfat sau glicerină. La o temperatură de 4 ° C, acestea pot fi depozitate timp de cel mult o zi. Colectarea materialului trebuie realizată cu un tub de sticlă rectal, care este introdus în rect.

Pentru investigarea materialului se selectează felii mucoase purulent, care trebuie spălate în două sau trei tuburi de soluție izotonică de clorură de sodiu.

Aplicarea bacteriilor patogene la mediul Ploskirev se face cu o spatulă de sticlă. Este necesar să se frece într-o zonă mică în agar, apoi să se rupă spatulul din mediu și materialul rezidual să fie frecat în suprafața neacoperită. Dacă semănatul se face în mai multe cupe, fiecare dintre ele trebuie să fie însămânțat cu o nouă porție.

Dacă piesele mucopurulent nu există în excrementele luate pentru analiză, aceasta nu înseamnă că microorganismele patogene nu sunt prezente acolo. În acest caz, este necesar să se emuleze fecalele în 10 ml soluție de clorură de sodiu (concentrație de 0,85%), apoi să se semene una sau două picături pe mediul Ploskirev. Scaunul emulsionat poate fi semănat în bulionul de selenită. Se utilizează și în cazul în care există vărsături sau apă de spălare în loc de fecale.

Diagnosticul microbiologic

În prima etapă a cercetării microbiologice, bacteriile patogene sunt însămânțate în două cupe, apoi se observă cum cresc shigella. Pe mediul Ploskirev se produce o recoltă, cea de-a doua fiind pe mediul Levin sau Endo.

Având în vedere apariția tulpinilor de Shigella rezistente la antibiotice, levomicina se adaugă la medii. Apoi, în 24 de ore incubarea are loc într-un termostat la o temperatură de 37 ° C.

A doua zi trebuie să studiezi coloniile crescute. Cei care nu cresc incolor pe un mediu de diagnostic diferențial trebuie să fie eliminați de mediul lui Russell sau de o scurtă "serie pestriță". Cercetările ulterioare se desfășoară în conformitate cu algoritmul culturilor primare pe ele. Coloniile de shigella pe mediul Ploskirev cresc sub formă de coloane transparente, incolore și mici. Ele sunt de două tipuri:

• aplatizate cu muchii zimțate;
• Rotunjit, convex, cu un luciu caracteristic umed.

Trei sau patru colonii trebuie să fie microscopate și examinate pentru mobilitate. În cazul în care acestea nu sunt găsite, ele sunt mutate în mediul Olkenitsky pentru a identifica o cultură pură. În absența coloniilor caracteristice de shigella sau dacă nu există deloc o creștere, este necesar să se producă bulion de selenită pe agar Endo sau Ploskirev. Dacă sunt prezente colonii tipice în cantități suficiente, se pune o reacție aproximativă de aglutinare. Folosit un amestec de sera Sonne și Flexner, reacția are loc pe sticlă.

Cercetări ulterioare

În cea de-a treia zi, se remarcă schimbările care au avut loc în coloniile din mediul ruselian. Dacă există o cultură care nu degradează lactoza și glucoza fermenți pentru a produce un acid, acesta este separat și analizat, petrece microscopie, precum și să efectueze însămânțarea în „rândul pestriță“, dar de data aceasta sa extins. Pune doar reacția de aglutinare, în vederea identificării serologice.

În ultima zi puteți să faceți o concluzie pe baza modificărilor din seria "păsărică" (dacă are loc fermentarea carbohidraților), precum și rezultatele reacției de aglutinare.

Depozitare și pregătire

Prepararea agarului Ploskirev este după cum urmează:

1. 55 g substanță uscată se agită în litri de apă distilată.
2. Se fierbe timp de două până la trei minute, până când agarul este complet topit.
3. Se toarnă în vase Petri (sterilitatea este opțională) cu un strat de 5-6 mm.
4. Cupele sunt lăsate deschise timp de o oră și jumătate la temperatura camerei (18-25 grade). La sfârșitul acestei perioade, mediul va îngheța și se va usca suficient.

Mediul Ploskirev este sensibil la lumină și higroscopic. Pudra trebuie depozitată într-un ambalaj sigilat, umiditatea relativă a aerului în încăpere să nu depășească 60%. Temperatură optimă de păstrare de la 2 ° C la 25 ° C Este necesar să se respecte aceste reguli de stocare, altfel pot apărea rezultate inexacte de cercetare.